大三巴牌坊全日开放天主教艺术博物馆和墓室09:00-18:00（17:30停止入场）逢星期二14:00之後休馆，澳门公众假期照常开放大三巴遗址09:00-18:00（17:30停止入场）
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根据第31/2018号行政法规，大三巴牌坊属於「圣保禄学院天主之母教堂遗址（大三巴牌坊、前地及石阶）」。
大三巴牌坊是天主之母教堂（即圣保禄教堂）正面前壁的遗址。
圣保禄教堂附属於圣保禄学院。该学院於1594年成立，1762年结束，是远东地区第一所西式大学，设文法学部、人文学部、伦理神学部等。由其培养的传教士，除到日本、中国外，还到越南、泰国、柬埔寨等地传教。
圣保禄教堂於1602年开始修建，现在牌坊左侧还存有当时的奠基石。整个建筑工程於1637至1640年间才完全竣工；目前所见的教堂前壁就是最後落成的部分。1835年，一场大火烧毁了圣保禄学院及其附属的教堂，仅剩下教堂的正面前壁、大部分地基以及教堂前的石阶。自此之後，这里便成为世界闻名的圣保禄教堂遗址。本地人因教堂前壁形似中国传统牌坊，将之称为大三巴牌坊。
教堂後部遗址於1837至1854年被用作埋葬教士的墓地。
1990 至1996 年间，澳门政府对圣保禄教堂遗址进行考古、修复及再利用工程，由葡国建筑师负责策划和设计，多位考古学家、历史学家和博物馆学家参加工作，经过五年考古、勘察及建造，建成一间博物馆，於1996年10 月落成。
建筑描述大三巴牌坊的建筑由花岗石建成，宽23米，高25.5米，上下可分为五层，自第三层起往上逐步收分至顶部则是一底边宽为8.5米之三角形山花，整个墙壁是巴洛克式，但一些设计或雕刻，却具有明显的东方色彩，如中文字或菊花图案，这座中西合璧的石壁在全世界的天主教教堂中是独一无二的。
牌坊第一层，即入口层，共有三个入口并有十枝爱奥尼柱式支撑及装饰墙面，大门两侧各三枝，侧门一边各两枝，小门门楣上有耶稣会会徽 IHS 的浮雕图案，正门上则写有“MATER DEI”，说明此教堂是供奉圣母；第二层相应是第一层之延续，墙壁由十枝科林新柱式及三个窗口组成，窗楣上均有七朵玫瑰花浮雕装饰，中间窗口侧两柱间以棕榄树装饰，侧窗洞两边柱间对称设有壁龛，分别置有四位天主教圣人的铜像；第三层是装饰最丰富的一层，并开始收分，墙中央设有一深凹之拱形壁龛，供奉圣母，两侧各有三个天使浮雕，此一层中央共有六枝混合式壁柱，两侧以方尖柱代替壁柱，是下面两层柱体的延续，各柱间均以浅浮雕装饰，左边是智慧之树和一只七头怪兽，其上有一圣母浮雕，侧有中文“圣母踏龙头”字样，而右边对称位置上则是精神之泉及一只西式帆船，上有海星圣母浮雕。在柱组外边是一涡卷，右边是一骷髅及中文字“念死者无为罪”；左边则是一魔鬼浮雕，中文则是“鬼是诱人为恶”，此层最外侧两块墙身是由两条带有圆顶之方尖柱，而墙侧则设有中国舞狮造型的狮子，作滴水之用；在第四层是一耶稣圣龛，两侧有耶稣受难之刑具浮雕，往外由四枝混合式壁柱组成，柱间以天使浅浮雕点缀，柱两边有弧形山墙。第五层是一三角形山花，中间有一铜鸽，顶部设有十字架。
南立面图
东立面图